3月25日從武漢大學(xué)獲悉,該校醫(yī)學(xué)研究院、中南醫(yī)院醫(yī)學(xué)研究院殷昊、張楹教授團(tuán)隊(duì)合作研發(fā)出一種新型新冠病毒快速核酸檢測方法:sPAMC。該方法具有高靈敏度、高特異性優(yōu)勢,操作便捷且快速,相關(guān)研究成果已于近日在線發(fā)表于業(yè)內(nèi)頂刊Nature Biomedical Engineering(《自然·生物醫(yī)學(xué)工程》雜志),武漢大學(xué)為第一署名單位。
殷昊介紹,RT—qPCR是目前廣泛應(yīng)用的新冠病毒檢測標(biāo)準(zhǔn),存在依賴專業(yè)儀器和專業(yè)人員操作、耗時(shí)長等痛點(diǎn)。而不依賴于專業(yè)儀器的CRISPR核酸快檢方法,可以簡單分為兩步法和一步法:兩步法兼具高特異性、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn),卻增加了操作復(fù)雜度和引入交叉污染等問題;一步法簡化了操作步驟并降低交叉污染風(fēng)險(xiǎn),但靈敏度顯著低于兩步法,且耗時(shí)長,需要約45分鐘至1小時(shí)。
殷昊、張楹教授團(tuán)隊(duì)開發(fā)的sPAMC方法,首次提出通過靶向非經(jīng)典PAM,降低Cas12a的順式和反式切割速率的方法來實(shí)現(xiàn)核酸檢測,將檢測速度提高2—3倍,可以實(shí)現(xiàn)在10—15分鐘內(nèi)檢測出DNA病毒,15—20分鐘內(nèi)檢測出RNA病毒,樣本間的可重復(fù)性高,檢測靈敏度提高,并為開發(fā)建立更快、更靈敏的CRISPR核酸檢測方法提供了新思路。
在新冠病毒真實(shí)樣品檢測中,研究者們使用sPAMC方法共檢測了204個(gè)咽拭子樣本,在104個(gè)陽性樣本中能夠檢出98個(gè)陽性,剩余的100個(gè)陰性樣本全部檢測為陰性,證明了sPAMC有94.2%的檢出率且無假陽性。此外,在檢測低病毒濃度樣品時(shí),sPAMC方法僅需20分鐘即可檢出病毒,表現(xiàn)出極強(qiáng)的靈敏度,并且僅用便攜式紫外燈或藍(lán)光燈照射即可觀察到結(jié)果,極大提高了檢測的便利性。
記者獲悉,sPAMC方法顯示出良好的應(yīng)用前景,下一步,殷昊、張楹教授團(tuán)隊(duì)也有意把相關(guān)研究成果以企業(yè)合作的方式推向應(yīng)用,實(shí)現(xiàn)核酸檢測方式更快、更便捷的突破。